Question

ई. कोलाई के क्लोनिंग संवाहक pBR322 में BamHI स्थल पर बाहरी डीएनए का सन्निवेश कराने पर यह किस प्रतिजैविक के प्रति प्रतिरोध क्षमता खो देता है? 
 

• A. जेन्टामाइसिन
• B. एंपिसिलिन और टेट्रासाइक्लीन
• C. टेट्रासाइक्लीन
• D. एंपिसिलिन

Hint:

pBR322 के लिए याद रखें: BamHI और SalI टेट्रासाइक्लीन प्रतिरोध को निष्क्रिय करते हैं, जबकि PstI और PvuI एंपिसिलिन प्रतिरोध को निष्क्रिय करते हैं।

Answer 1

The Correct Option is C

चरण 1: प्रश्न को समझना:
प्रश्न में पूछा गया है कि यदि एक बाहरी डीएनए को क्लोनिंग वाहक pBR322 में BamHI प्रतिबंधन स्थल पर डाला जाता है, तो कौन सी प्रतिजैविक प्रतिरोधकता निष्क्रिय हो जाएगी। इस प्रक्रिया को सन्निवेशी निष्क्रियकरण (insertional inactivation) कहते हैं।
चरण 2: pBR322 वाहक की संरचना का विश्लेषण:
pBR322 एक सामान्य रूप से उपयोग किया जाने वाला क्लोनिंग प्लाज्मिड है। इसकी मुख्य विशेषताएं हैं:
• इसमें दो प्रतिजैविक प्रतिरोधक जीन होते हैं: एक एंपिसिलिन प्रतिरोधक जीन (amp\(^R\)) और एक टेट्रासाइक्लीन प्रतिरोधक जीन (tet\(^R\)).
• amp\(^R\) जीन में PstI और PvuI के लिए प्रतिबंधन स्थल होते हैं।
• tet\(^R\) जीन में BamHI और SalI के लिए प्रतिबंधन स्थल होते हैं। चरण 3: सन्निवेशी निष्क्रियकरण का विश्लेषण:

• जब एक बाहरी डीएनए खंड को एक जीन के भीतर स्थित एक प्रतिबंधन स्थल पर डाला जाता है, तो वह जीन बाधित हो जाता है और अपना कार्य नहीं कर पाता है।
• प्रश्न के अनुसार, बाहरी डीएनए को BamHI स्थल पर डाला गया है।
• चूंकि BamHI स्थल टेट्रासाइक्लीन प्रतिरोधक जीन (tet\(^R\)) के भीतर स्थित है, इसलिए इस जीन का अनुक्रम बाधित हो जाएगा।
• इसके परिणामस्वरूप, प्लाज्मिड टेट्रासाइक्लीन के प्रति अपनी प्रतिरोधक क्षमता खो देगा। हालांकि, एंपिसिलिन प्रतिरोधक जीन अप्रभावित रहेगा। चरण 4: अंतिम उत्तर:
BamHI स्थल पर डीएनए डालने से टेट्रासाइक्लीन प्रतिरोधक जीन निष्क्रिय हो जाता है। अतः, सही उत्तर विकल्प (C) है।